乙酰化低密度脂蛋白是一種經過化學修飾的低密度脂蛋白(LDL),在生物醫(yī)學研究中具有重要的應用價值。其制備與存放要求嚴格,以確保其活性和穩(wěn)定性。
原材料準備:
選擇健康人源血漿LDL作為起始材料,確保無Hepatitis C、HIV-I和HIV-II等病毒污染。
使用大分子化合物(如聚乙二醇)除去LDL和高密度脂蛋白(HDL)以外的血清脂蛋白。
金屬離子沉淀:
采用金屬離子(如銅離子)沉淀LDL,通過調節(jié)pH值和離子強度優(yōu)化沉淀條件。
緩沖液溶解:
使用特定緩沖液(如含有EDTA的PBS,pH 7.4)溶解沉淀,并去除未反應的金屬離子。
乙酰化修飾:
將LDL載脂蛋白上的賴氨酸殘基進行乙酰化修飾,阻止其與LDL受體結合,但增強其與清道夫受體的結合能力。
無菌包裝:
制備完成后,進行無菌過濾和分裝,確保產品無菌且可直接用于細胞培養(yǎng)或體內實驗。
乙酰化低密度脂蛋白存放要求:
溫度控制:
低密度脂蛋白應存放在4°C的無菌環(huán)境中,避免凍存,因為凍存會導致蛋白質變性和活性喪失。
避光保存:
存放時應避免強光直射,以防止光敏反應導致的蛋白質降解。
穩(wěn)定性監(jiān)測:
定期檢查產品的穩(wěn)定性,包括外觀、濃度和生物活性,確保其在有效期內保持良好狀態(tài)。
使用期限:
根據(jù)生產商提供的信息,低密度脂蛋白通常在4°C下可穩(wěn)定保存數(shù)周至數(shù)月,具體期限需參考產品說明書。
